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  华宇娱乐-钱取不出来文献2珍稀药用菌樟芝研究现状与进展 - 杭州逗米生物科技有限公司.doc

  文献2珍稀药用菌樟芝研究现状与进展 - 杭州逗米生物科技有限公司.doc

  食用菌学报 2003.10(4):55-60 Acta Edulis Fungi 文章编号:1005-9873(2003)04-0055-06 珍 稀 药 用 菌 樟 芝 研 究 现 状 与 进 展 陈体强,方忠王2,3 ( 福建省农业科学院植保所,福州350013;2福州闽江线 福州华源本草医药研究开发有限公司,福州350018) 摘 要:樟芝(Antrodia camphorata)是一种原产于台湾的药用多孔菌,腐生于台湾名贵树木牛 樟树(Cinnamomum kanehirai)上。本文介绍了樟芝的分类学和形态学特征、主要化学成分、生物活 性与药理作用,牛樟树和易与其混淆的近似种,以及福建和台湾樟芝研究的现状。 关键词:樟芝;牛樟树;药用菌 中图分类号:S567.39 文献标识码:A 樟芝()是一种原产于我国台湾省的珍稀药用菌,主要分布在台湾省的桃园、苗栗、南投、高雄及屏东等地海拔1000m以上的深山密林中,生长在台湾名贵树木———牛樟树(Cinnamomum kanehirai)上,通常腐生于上百年的树干空洞内。樟芝又名牛樟菇、樟窟内菇、红樟芝,有“台湾森林红宝石”之美称。在东南亚国家盛传樟芝能解毒抗癌,对癌症、食物中毒等危急病症具有神奇的疗效。因其产量稀少,价格昂贵,在市场上每公斤售价高达10万新台币。牛樟树是台湾特有的原生稀有珍贵树种,经当地林业管理部门划编保护区予以保护。台湾将樟芝及牛樟树列为珍稀保护物种,禁止采伐和公开贩卖,盗伐牛樟木和偷窃牛樟菇是要按破坏自然生态保育罪依法判刑的。 1 樟芝的分类学与形态学研究 1.1樟芝的学名 樟芝新种第一次发表于1990年,因当时模式标本在实验室中沾染了灵芝类的孢子,在新种发表时 误 将 灵 芝 孢 子 描 述 成 樟 芝 的 孢 ,将 其 作 为 台 湾 产 灵 芝 属 一 新 种 (Ganoderma camphoratum M.Zhang&C.H.Su,sp.nov),并将其寄主误认作香樟树(Cinnamomum camphor(L)Presl.)。1995年,张东柱等人根据樟芝子实体外观、气味、生长速度和孢子显微结构的研究结果,将其正确归入薄孔菌属,学名修订为Antrodia cinnamomea。1997年,台湾省林业试验所的吴声华等人重新整合前两次发表的有关这个新种的文献内容,最终将樟芝学名订正为Antrodia camphorate(M.Zhang&C.H.Su)Sheng H.Wu, Leif Ryvarden&T.T.Chang,并把张东柱 收稿日期:2003-01-14初稿;2003-03-25修改稿 基金项目:本研究得到福建省科技厅国际合作项目(2000-I-013)资助 作者简介:陈体强(1968- ),男,1989年毕业于福建农业大学土壤与农业化学系,副研究员,主要从事药用真菌、植物与微生物学研究,在学术性刊物上发表论文23篇。 等(1995)所定的A.cinnamomea TT Chang&WN Chou处理为A.camphorata的同义名(同物异名) 。该新组合学名发表后,已被台湾学术界及产业界接受。 1.2 樟芝的近似种 易与樟芝混淆的近似种为同属的香薄孔菌(Antrodia odora)《中国真菌志·多孔菌科》 ,别名香杉芝(台湾省),生于云南松和云杉腐木上。其担子果一年生,平伏紧贴在基物上,孔面淡黄色至淡黄褐色,孢子腊肠形到圆柱形,稍弯曲,透明,平滑,5-6*1-1.5um;新鲜标本也有较强的香味 。香杉芝常被充作樟芝,混入线子实体 樟芝腐生于牛樟树老树立木或倒木上,生于树干中空内壁的称为樟窟内芝,少数生于树干外部的称为樟外芝。樟芝子实体有浓郁的樟香味,外型为板状、钟状、马蹄型或塔型,一般以板状居多。子实体生长极为缓慢,大小变化极大,小至一层薄片,大至20*30cm,重达5kg以上;老熟后成钟状,皮壳黄褐色,外皮有明显的环状构造,质地极其坚硬 。子实体表面鲜艳如鲑鱼色,老熟后颜色渐淡,成淡桔黄色或黄色,子实体下层淡黄色,厚约0.6cm。菌管长0.3 - 0.5cm ,孔口乳黄色,管口近圆形,每毫米2 - 3 个, 不规则。子实体附着于树干部分为浅黄色之木栓层,质地柔软。新鲜或干老樟芝均带有樟木的清香味。老熟的樟芝可以点着火并产生油滴。 1.3.2 菌丝 菌丝系统 二体型:生殖菌丝(Generative hypha)透明微黄,壁薄,胞径 1.5-2.5um,有锁状联合;骨架菌丝(Skeletal hypha)淡黄色,壁厚到近实心,胞径 2.5-4.5um。 1.3.3 孢子 担孢子(Basidiospore) 1.4 樟芝寄生树种 牛樟树为台湾特有的常绿阔叶高大乔木,生长在海拔450-2000m的山区,主要分布在桃园复兴乡、角板山;苗栗南庄乡、三湾乡;南投竹山镇、水里乡;高雄六龟 。樟芝生长期上百年,胸径可达32-140cm,百年老牛樟的胸径通常大于 100cm,每株价值 20多万新台币。在台湾省屏东林管处所辖大安溪上游的雪山坑牛樟树自然保护区,就有一百余株树龄上百年的牛樟树。明末清初以前,牛樟树曾是台湾山区常见的树种。据说,那时候山中的牛樟树林立,倒伏的树也很多,新艳红橙色的樟外芝随手可采。樟芝是已知的、唯一引起牛樟树木材褐腐的真菌,一般生长在心材已腐朽的老树干的中空内壁,也有少部分生长在树干倒伏之牛樟木材阴暗 潮湿之表面,发现着实不易。牛樟树是我国台湾省特有的保育类树种,由林务处或林管局依法保管,窃盗牛樟树者将因涉嫌违反森林保育法而移送法办。生长樟芝的牛樟树,常被误作为同为樟科的另一珍稀保护树种———沉水樟[Cinnamomum micranthum (Hayata)Hayata],后者也是樟科的珍稀保护树种,又称有樟(福建) ,主要分布在台湾、福建、浙江、江西、湖南、广东和广 西等地,生长于海拔低于900m的山坡或溪边,在福建省万木林自然保护区山坡中下部分布有180亩沉水樟林。 2 樟芝的化学成分与药理学研究 2.1 樟芝的生理活性与化学成分 樟芝具有增强免疫能力、抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗过敏、抑制血小板凝集、降血压、降血糖、降胆固醉、保护肝脏(解毒、促进肝细胞再生)等生理活性功能。樟芝成分复杂,含有多糖 ()、三萜类化合物、超氧歧化酶(SOD)、腺苷、蛋白质(含免疫蛋白)、维生素(VB、VPP)、不饱和长链脂肪酸、麦角甾醇、微量元素、核酸、凝集素、氨基酸、薄孔菌酸 (Antrodia acid)等组分(杨书成,1990; 高晓薇, 1991;简秋源,1991;程一华,1994;吴德鹏,1995;黄惟敏,1999)樟芝最主要的生理活性成分是多糖 ( β-D-葡聚醣)和三萜类化合物 (Triterpenoid()表1)。 表1 樟芝子实体和菌丝体的化学成分 Table1 Components of Antrodia camphorata fruitbadies and mycelia 试样 Samples tested 水份 Moisture (mg/100mg 粗脂肪 Crude fat (mg/100mg) 总碳水化合物 Total carbohydrate (mg/100mg) 粗蛋白 Crude protein (mg/100mg) 麦角甾醇 Ergosterol(mg/kg) 弘光技术学院lege 葡萄王企业 Grape KingInc. 子实体 Fruitbodies 7.33 32.23 36.91 6.60 1.27 0.713 菌丝体 Mycelia ≤5.00 - 53.46 23.84 4.62 2.297 樟芝多糖含β-D-葡聚糖结构,除具降血糖功能外,亦具有降低胆固醇和血脂之功效。三萜类化合物是樟芝的主要化学成 分 之 一,与 多 糖 一 样 具 有 抑 制 癌 细 胞 增 殖 的 作 用。程 一 华(1993)报道,从樟芝子实体中分离出的三萜类Compoundβ具有降低四氯化碳诱发的急性肝障碍小鼠血中谷丙转氨酶(GPT)之作用。Chiang等人(1995)发现,樟芝子实体萃取物中含有三种新的以麦角甾烷 (Ergostane)为骨架的三萜类化合物:Antcin A、Antcin B、Antcin C。CherngIH等(1996)以同样 的 分 析 方 法 再 度 发 现 四 种 新 的 三 萜 类 化 合 物:Antcin E、Antcin F、Methyl antcinate G 和 Methyl antcinate H。而Yang SW和Shen YC等(1996)则发现了二种以麦角甾烷为骨架的新化合物Zhankuic acid D和Zhankuic E, 以及三种以羊毛甾烷(Lanostane)为骨架的新化合物 。羊毛烷类衍生物和某些三萜类,可以通过抑制血管紧张肽转化酶(ACE)活性而达到降血压的目的,亦具抑制组织胺(Histamine)释放的作用,可有效地防止高血压患者因血压过高导致脑血管破裂而中风。 表2 樟芝子实体和菌丝体的氨基酸含量 Table2 Amino acid contents of Antrodia camphorate fruitbodies and mycelia (10mg/g) 氨基酸 Amino Acid 子实体 Fruitbodies 菌丝体 Mycelia 氨基酸 Amino Acid 子实体 Fruitbodies 菌丝体 Mycelia 天冬氨酸 Asp 0.76 2.75 蛋氨酸 Met 0.00 0.22 苏氨酸 Thr 0.41 1.47 异亮氨酸 Ile 0.33 1.34 丝氨酸 Ser 0.49 1.51 亮氨酸 Leu 0.50 2.26 谷氨酸 Glu 0.85 2.88 酪氨酸 Tyr 0.46 1.13 脯氨酸 Pro 0.37 1.50 苯丙氨酸 Phe 0.73 1.39 甘氨酸 Gly 0.40 1.37 赖氨酸 Lys 0.37 1.34 丙氨酸 Ala 0.51 1.95 色氨酸 Trp 0.00 0.00 胱氨酸 Cys 0.03 0.15 组氨酸 His 0.16 0.68 缬氨酸 Val 0.38 1.70 精氨酸 Arg 0.41 2.09 表3 樟芝子实体和菌丝体的脂肪酸含量 Table 3 Fatty acid contents of antrodia camphorate fruitbodies and mycelia (mg/kg) 试样 Sample tested 脂肪酸 Fatty acid 肉豆蔻酸(十四烷酸) Tetradecoic acid (C14:0) 棕榈酸 Palmitic acid 硬脂酸 Stearic acid 油酸 Oleic acid 亚油酸 Linoleic acid 子实体 Fruitbodies 13.69 10.69 12.03 7.24 14.08 菌丝体 Mycelia 40.18 13.11 20.37 6.51 26.31 2.2樟芝的药理试验 台湾研究人员进行了多项樟芝药理评估性试验。试验结果表明,樟芝提取物可显著促进小白鼠腹腔巨噬细胞和脾脏自然杀伤(NK)细胞的活性,亦可影响 T4淋巴细胞而改变细胞的免疫功能;对子宫颈癌、胃癌、肝癌、乳癌的疗效试验表明,樟芝可清除自由基(台北医学大学,2001;食品工业发展研究所, 2001);中兴大学食品科学系一项液体培养樟芝菌丝体萃取物的抗氧化能力评估试验发现,发酵后的菌丝体及滤液的抗氧化能力皆高于发酵前的菌丝体,且萃取物的总多酚类含量与抗氧化能力呈正相关;台湾大学医学院生物化学研究所的试验发现,冻干樟芝菌丝体的热水与乙醇萃取物对肝肿瘤细胞株皆具有明显的毒杀作用,尤以乙醇萃取物的效果最显著;台湾中医药研究院营养系(沈立言,)的研究发现,发酵培养的樟芝菌丝体萃取物对提高大白鼠初代肝细胞生存力、抗氧化能力和解毒代谢能力皆有良好效果;台湾省农委会的研究报告中提到,樟芝菌株An5在5 L 发酵槽内培养170 h 的发酵液,能显著抑制Hela、AGS、MCF-7、HepG-2等肿瘤细胞生长;台湾大学医学院药学系的研究发现,樟芝菌丝体提取物对鼠类淋巴癌细胞P-388有明显的毒杀作用,樟芝菌丝体的热水萃取物,能刺激正常成人血液中的淋巴细胞产生细胞激素,以杀死U-937人类淋巴癌细胞;台湾师范大学生物研究所的一份研究报告指出,樟芝菌丝体的甲醇萃取物可抑制金黄葡萄球菌的生长,同时具有弛缓肠道运动和抑制血小板凝集作用。此外,多种肠道细菌亦会受到樟芝萃取物的抑制;中兴大学食品科学研究所的一项研究显示,樟芝菌丝体和子实体可以有效地抑制酒精代谢产生的抗氧化酶活性水平,从而降低酒精诱发的急性肝损伤。 3 樟芝人工驯化栽培与产品开发研究 3.1台湾省的樟芝研究与开发概况 1995年,食品工业发展研究所、台湾大学食品科学研究所、中兴大学食品科学研究所和台北医学院等二十多个单位先后研究樟芝人工栽培技术,取得许多重要进展,但人工栽培樟芝尚有一定难度。近年来,一些知名的生化公司(善笙生物科技公司、省今朝实业)也积极参与樟芝菌丝体的发酵培养,以取代子实体之不足,并保护森林资源。辅仁大学、屏东科技大学和静宜大学进行过樟芝产品的开发研究。 1999年,以葡萄王企业(Grape King Inc.)为代表,成功地采用搅拌通气式发酵罐(槽)大量生产樟芝菌丝体,并进行热水萃取、固液分离,然后减压浓缩、冷冻干燥,获得高纯度樟芝菌丝体冻干粉末,经包装、灭菌,得到菌丝体提取物成品。发酵培养的樟芝菌丝体经真空干燥制成的微细粉未(菌粉)呈棕褐色,有樟香味。此外,陈启祯博士通过固体培养方式成功地获得有苦味的樟芝菌丝体成品,口感较接近子实体的味道,其三萜类化合物含量高于液体培养的菌丝体,但多糖成分低于液体培养的樟芝菌丝体。 台北荣民总医院毒物研究室对菌粉安全性进行的毒理学研究发现,连续28d饲喂冻干樟芝菌粉的SD大白鼠,并未发生急性中毒现象,解剖后作病理学检查,未发现任何特异性病变。 连续14d口服大剂量(3000mg/kg)樟芝菌丝体(冻干菌粉)的大白鼠,无一例死亡,亦未发生急性中毒现象。大剂量(500mg/kg.d)樟芝发酵原液冻干粉致畸试验发现,对大白鼠胚胎发育无任何不良影响。微核及染色体畸变试验结果均显示樟芝无致突变性。目前,台湾的樟芝保健产品主要成分为樟芝菌丝体及其萃取物。台湾樟芝研究协会在市面上销售的 “好康生活” 极品纯樟芝(由菌丝体冻干粉+ 菌丝体萃取物制成的胶囊),每盒80粒胶囊(每粒胶囊600mg,含三萜类化合物30%,高分子多糖8 % )。善笙生物科技公司(Simpson Biotech.)亦通过发酵工程培养樟芝菌丝体,其菌粉经审查获准作为功能性食品原料(台湾省卫署食字 第0900020193号函)。葡萄王企业出品的牛樟王胶囊(每粒600mg),主要成分为樟芝菌丝体萃取物及萃取后之菌丝体,其铝箔包装胶囊和散剂已于2000年11月上市。 目前,台湾正在开展的有关樟芝研究开发计划还有:1.牛樟菇安全性、抗基因毒性及抗过敏性之评估(江素瑛,台湾中医药学院中医所);2.樟芝对人体脐带血管内皮细胞之影响及作用机制之探讨(杨新玲,台湾中医药学院营养系);3.牛樟菇之成分、免疫调节活性及产品开发 研制(赖宏亮,屏东科技大学园艺系);4.樟芝对血糖及血脂质之影响(蔡敬民,辅仁大学食品营养系);5.液体培养樟芝菌丝体萃取物抗氧化及抗肿瘤特性之探讨(颜国钦,中兴大学食品科学系);6.牛樟菇之生物活性物质及其出菇条件探讨(曾显雄,台湾大学植物病理学系,台湾林务局资助项目)。 3.2 福建省的樟芝研究与开发现状 1997年,福建省农业区划研究所从由台湾带回的新鲜樟芝子实体中成功地分离到樟芝菌 种,并利用福建本地的香樟树木屑培养基进行樟芝的试验性栽培。结果表明,樟芝菌丝生长极 为缓慢,该研究计划以失败而中断。同年,福建省农科院植保所从闽台民间交流渠道引进樟芝 菌种 (TFRI 119、TFRI B25和CWN 01385),开展了樟芝生物学特性的研究,并利用香樟段木进行栽培试验。结果发现,已充分发菌的菌材,仍难以长出子实体。因此,科研人员认为樟芝与银耳一样,需要一种伴生真菌才能成功地培养出子实体。1999年后,福建省农科院植保所也转 向樟芝菌丝体发酵培养技术的研究,发现樟芝菌丝体摇瓶培养过程不易受污染,其二次代谢产 物中含有抑菌物质,这与徐敬衡等(1997年)的研究结果相符。 福建省农业科学院的黄大斌等(2001)初步研究了樟芝的生物学特性,发现樟芝菌丝生长的最适pH为6 - 7,最适温度为28℃,沉水樟木屑培养基的最适含水量为58.5%,最适碳原为葡萄糖2%,最适氮源为柠檬酸铵0.2%。 山东莱阳农学院的宋爱荣(2001)的研究结果表明,樟芝对乳糖的利用效果较差,而对麦芽糖的利用效果最佳,其菌丝球数量(2244/100ml)是乳糖(607/100ml)的3.7倍,菌丝体干重(1362.5mg/100L)比乳糖(529.0mg/100ml)高2.6倍。福建农林大学的谢宝贵等(2002)研究了樟芝的生物学特性及利用气升式发酵罐培养菌丝体的条件,平均每升培养液获得11.3g菌丝体(干重),并初步研究了樟芝菌粉对小白鼠免疫功能的影响。 2002年7月,我们设计了一种液体浅层培养新工艺,促使樟芝在产生足够数量菌丝体后进入相对静止培养过程,诱导产生胞外多糖、三萜类化合物及香味物质等次生代谢产物,并将发酵液浓缩后与菌丝体一起烘干磨粉,获得有樟香味、带苦味的樟芝菌粉,平均每升培养液可收获38.6g干品。对樟芝菌粉的主要化学成分进行了初步测试分析,同时计划开展安全毒理学及保健功能评估试验。 樟芝及其寄(腐)生的牛樟树是我国台湾省特有的珍稀药用菌和树种,目前除台湾省外,中国其他地区从事植物或真菌分类研究的权威机构还没有收集、保藏其菌种、树种或标本,在出版的真菌志或植物志中均未收录樟芝或牛樟树。希望本文对今后开展樟芝或牛樟树的研究提供有用的参考资料。

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