金牛娱乐-首页中国微生态学杂志2010年 9月第 22卷第 9期 857 文章编号:1005-376X(2010)09-0857-02 【综述】 樟芝的食用安全性研究进展 陈娟, 姜兴华, 范青生, 余宙, 付俊鹤 (南昌大学中德联合研究院, 江西 南昌 330047) 【摘要】樟芝在台湾有悠久的食用历史, 具有显著的保健作用。 但由于未被国家卫生部批准, 而无法进入大陆市场。 目前已有多个研究机构对樟芝子实体与菌丝体安全性进行研究, 急性毒性试验表明樟芝为无毒级物质,基因毒性试验, 微核试验, 染色体结构变异分析, 30天、90天喂食毒性试验及致畸试验中, 均未出现阳性反应, 证明樟芝的安全性是有保障的。 根据食品安全评估的要求, 樟芝作为食品和药品的新原料是可行的。 【关键词】樟芝;毒理;安全性; 【中图分类号】R949.329.7 【文献标识码】A Advance in researches on the safety of Antrodia camphorata CHENJuan, JIANGXing-hua, FANQing-sheng, YUZhou, FUJun-he, (Sino-German Joint Research Institute Nanchang University, Nanchang330047, China) 【Keywords】Antrodia camphorata;Toxicity;Safety 樟芝(Antrodia camphorata)又称牛樟芝、牛樟菇、樟内菇、红樟菇, 系多孔菌科(Polyporacae)薄孔菌属(Antrodia)真菌, 为我国台湾特产的传统食药用真菌。 樟芝仅生于台湾深山(海拔 450 ～ 2000 m)特有的“国宝”级树种———百年以上的牛樟树(Cinnamomum kanehiraiih Hay)上, 其生长环境均属于幽暗、潮湿且温度稍低之中海拔地区。 民间视其为解毒、保肝和抗肿瘤的珍贵真菌, 素有 “药中之王”、“台湾森林中之红宝石”的美誉。 樟芝的保健功效主要表现在以下几个方面: (1)抗氧化:其主要作用机制为抑制脂质过氧化和清除自由基。 【收稿日期】2010-05-24 【作者简介】陈娟(1986-), 女, 在读硕士研究生, 从事保健食品研究余宙 (1977-), 女, 通讯作者, 硕士, 讲师, 从事保健食品研究, Email:yuzhou@ (2)保肝护肝:樟芝在保肝护肝方面具有显著功效, 一直以来原住民将樟芝视为最珍贵的药材。 樟芝不但对酒精性肝损伤, 化学性肝损伤有保护作用, 而且还具有抗乙肝病毒活性。(3)抗肿瘤:有实验表明樟芝的培养基滤出物能强烈抑制乳腺肿瘤细胞、宫颈肿瘤细胞、胃肿瘤细胞、肠肿瘤细胞、肝肿瘤细胞、结肠肿瘤细胞及红细胞肿瘤细胞等细胞株的生长。另外樟芝还具有抗炎,免疫增强等功效, 具有很高的研究价值。 1安全性评估要求 如果通过我国保健食品的认证, 樟芝产品能够进入大陆市场。 因此, 我们可以参照保健食品评价要求, 对樟芝进行必须的毒理性实验。 根据保健食品安全性毒理学评价的要求,以普通食品和卫生部规定的药食同源以及允许用作保健食品的物质以外的动植物或动植物提取物、微生物、化学合成物等为原料生产的保健食品, 按照以下不同情况确定试验内容:(1)国内外均无食用历史的原料;(2)仅在国外少数国家或国内局部地区有食用历史的原料;(3)在国外多个国家广泛食用的原料。樟芝属于第二类, 因此应进行三个阶段的毒理试验,包括:第一阶段,急性毒性试验;第二阶段,遗传毒性试验, 30d喂养试验和传统致畸试验;第三阶段,亚慢性毒性试验——90 d喂养试验。现将樟芝安全性研究结果综述报告如下。 2毒理试验 2.1急性毒性试验 中国台湾财团法人生物技术开发中心探讨了樟芝子实体与菌丝体有无口服急性毒性, 分別以 3000mg/kg的樟芝菌丝体及630mg/kg的樟芝子实体喂食SD大鼠, 观察14d, 均未发现死亡且并无任何临床毒性症状显现。 在以樟芝发酵液全液冻干品样品的急性毒性试验中,各组动物活动正常,毛皮光泽度好, 未见任何中毒症状和死亡, 雌性、雄性小鼠 LD502000 mg/kg。根据急性毒性半数致死剂量分级,属无毒级物质。 2.2遗传毒性试 2.2.1基因毒性试验 中国台湾大学医学院实验动物中心研发组用国鼎樟芝样品进行细菌基因突变测试——Ames试验。利用一系列具有组氨酸需求性的沙门菌突变菌系,受致变物质刺激时,由需要组氨酸之营养缺失型恢复突变为能自行合成组氨酸的野生型的特性,用缺乏组氨酸的选择培养基检定, 以测知化合物的致变性或致癌性。此测试用于评估国樟对基因造成伤害的能力。试验选用5种菌株(TA97、TA98、TA100、TA102和TA1535), 樟芝进行细菌基因突变测试的浓度分别为 3、6、12、25和 50 mg/ml另设溶剂对照组与阳性对照组, 并进行2种处理, 一种是加入 S9(大鼠肝脏活化酵素系统)下, 以不同浓度樟芝处理菌株30 min;第二种是不加入S9下,以试验物质处理菌株30 min, 置入培养箱培养48 h后计算菌落数。 结果表明, 没有任一浓度组菌落总数比阴性对照组有显著增加, 为阴性反应。 樟芝菌丝体发酵全液冻干品无论在水溶性还是脂溶性部分, 当浓度为5000μg/plate时, 对这5种菌株均无致突变性。 中国医药大学探讨樟芝的致基因毒性及抗基因毒性,以樟芝菌丝体发酵液处理TK6人体淋巴母细胞,所引发tk基因的突变率,无论是否加入S9 混合物,都没有显著高于阴性对照组。 进一步以胃管喂食C57B16 小鼠,樟芝剂量为300、1 000和3000mg/kg,每天1次,15次后小鼠体重无减轻现象,樟芝组小鼠脾脏淋巴细胞 hprt基因的突变机率与阴性对照组小鼠比较差异无统计学意义,证明樟芝在本实验所使用的剂量对小鼠无致基因突变作用,此试验还证明了其对化学致癌物DAC所诱发的DNA损伤有明显的拮抗作用,即抗基因毒性。 2.2.2 微核试验利用周边血液微核试验评估樟芝菌丝体发酵全液冻干品的体内基因毒性,结果显示,各剂量对雄性小鼠周边血液中微核的生长比例,与阴性对照组比均在血液正常范围内。 以喂管方式喂食给8 周大ICR雄性及雌性小鼠国鼎樟芝样品,进行啮齿类动物周边血液微核测试,测试浓度分别为26.8、16.75和 0.335 mg/只,每一测试浓度分别投予10只老鼠,并在处理后90d时间採血,制成血液抹片, 结果显示,樟芝的所有实验浓度皆不会显著增加网状红血球微核发生的频率,结果为阴性反应。 2.2.3染色体结构变异分析分析分裂中期的中国仓鼠卵巢细胞,观察并计数其引发异常形态染色体的频率,用于评估樟芝对细胞染色体造成伤害的能力。以国鼎樟芝为样品,测试浓度分别为3、6、12、25和50mg/ml另需溶剂对照组与阳性对照组。 每一测试浓度做 2次重复培养, 并分别进行 3种处理方式, 一种是不加入 S9(老鼠肝脏活化酵素 ), 以樟芝处理细胞3 h;第二种是加入S9,以樟芝处理细胞 3 h;第三种是不加入S9下,连续处理细胞20 h。都在20h收细胞并制作染色体玻片。结果表明,所有试验浓度皆不会显著增加诱发染色体结构变异的频率,樟芝的染色体结构变异分析的结果为阴性反应。 2.3亚急毒性试验 大鼠喂食樟芝菌丝体发酵全液冻干品30 d后,未发现与实验有关的病理形态改变。不同剂量樟芝样品组的大鼠生长情况良好,与阴性对照组差异无统计学意义,各实验组的血红素、红细胞、白细胞计数及其分类的检查结果、血清生化值结果与对照组大鼠相比均在正常范围内;大体解剖肉眼观察结果,各剂量组动物脏器未发现明显病变,选高剂量组 (4.5g/kg)及对照组做组织学检查,结果未发现异常。 SD大鼠以樟芝发酵菌丝体经口服, 重复剂量 [ 3000 mg/(kg·d)]喂养28d后,所有实验动物均存活,与对照组相比,未出现任何临床毒性症状,体重的增加差异无统计学意义;尸体解剖与肉眼检查,均未发现任何组织异常病变。此剂量可作为樟芝发酵菌丝体“不造成任何不良副作用”的剂量参考。 2.4致畸试验在致畸试验中,给予樟芝菌丝体发酵全液冻干品的各剂量组与对照组均存活且无任何临床毒性症状出现,所有怀孕雌鼠在试验期间并未发现明显的临床症状,子宫重量平均值,胎鼠检查数,胎鼠平均重,胎鼠性别比例,卵巢黄体数着床数、胎儿再吸收数,死胎数,存活胎鼠只数,着床前流失率和着床后死亡率方面, 差异均无统计学意义。试验最高剂量为500mg/(kg·d),约为人体建议服用量的 2.4倍。以喂食SD怀孕雌鼠樟芝发酵原液冻干品进行测试,评估该实验物质对胚胎的影响极其造成畸胎的可能性。各剂量组分别为50、150和 500mg/(kg·d), 结果显示:试验期间,各剂量组与对照组动物均存活,且无任何临床毒性症状显现。怀孕第20天,怀孕雌鼠进行剖检,肉眼检查内脏器官并未发现任何病变,所以此试验最高剂量[ 500mg/(kg·d)]的樟芝发酵原液冻干成品处理并未对大鼠胚胎发育造成任何不良影响,未显示任何致畸作用,此剂量为人体建议服用剂量[25mg/(kg·d)] 的 20倍,可提供孕妇服用的安全性参考。 2.590d喂食毒性试验经重复给予国鼎樟芝样品90d,评价对小鼠可能产生的毒性影响。实验对象为6周龄健康的Balb/c小鼠雌雄性各40只,在一定环境条件下饲养,雌雄性各分为4组各10只,分别为:空白对照组(不给任何处理)、低剂量组(0.335mg/0.3c.c./25gmouse)、中剂量组(16.75mg/ 0.3c.c./25gmouse)、高剂量 组(26.8mg/0.3c.c./25g mouse)。用喂食管,以每日1次口服0.3c.c.的方式连续给予樟芝 90d,与对照组相比,结果显示:(1)外观没有特别的差异,毛发色泽也没有明显的变化;(2)从实验开始到结束都没有动物死亡;(3)体重没有明显的差异;(4)摄取饲料量并无明显差别;(5)血液学检查(包括白血球数 、红血球数、血容比、血色素量、红细胞体积分布宽度、红细胞分布宽度数、平均红血球容积、平均红血球血色素量、平均红血球血色素浓度、血小板、血小板比值、血小板分布宽度数、平均血小板体积、大血小板数、淋巴细胞、中性粒细胞和中间细胞)未见明显的变化;(6)血液生化学检查 (包括总蛋白、血尿素氮、肌酸苷、 ALT、AST、葡萄糖和总胆固醇、白蛋白、总胆红素的测定)未见明显的变化, 电解质(钾、钠、氯)检查亦未发现明显变化;(7)肉眼观察其解剖脏器, 未观察到有何显著的病变, 其肝、脾、肾的重量亦未有明显的差异。 研究樟芝的安全毒性的试验中, 设计低、中和高3个剂量,即0.5、1.5和4.5 g/kg, 以及空白对照组喂食SD大鼠, 结果显示, 喂食不同剂量樟芝样品的大鼠生长情况均良好,与阴性对照组差异无统计学意义,各实验组的血红素、红细胞、白细胞计数及其分类的检查结果、血清生化值结果与对照组大鼠比较均在正常范围内;大体解剖肉眼观察各剂量组动物脏器,未发现明显病变,选高剂量组及对照组做组织学检查,结果均未发现异常。因此大鼠喂食樟芝菌丝体发酵全液冻干品90 d后,未发现与实验有关的病理形态改变。荣民总医院医学研究部 90d的喂食试验中, 最高剂量达到每日摄食食物总量的2%,实验组在体重、血液生化值、肝脏、肾脏、脾脏及肾上腺重量变化也均与对照组差异无统计学意义。 3人体食用历史情况 樟芝保健食品在台湾、日本和香港都已上市多年, 樟芝菌丝体在台湾已被台湾卫生部门批准为保健食品。国鼎生技公司开发菌丝体牛樟芝,获台湾卫生署健康食品字号【卫署健食字第 A00124 号】,这是第一家取得樟芝护肝健字号的厂商。国鼎牛樟芝 2007年得到营养保健食品的台湾品质标准,获新创奖。目前已在全省 2000个以上的保健食品店、药房、诊所、中药房等销售,并外销大陆、日本、东南亚等地。樟芝具有安神、行气、化瘀活血、温和消积,解毒消肿及镇静止痛之效, 为上等的食(药)用真菌。樟芝在台湾有悠久的食用历史,早期台湾原住民患肝病后, 将樟芝熬煮的汤汁,服用后竟然痊愈。在台湾民间, 樟芝可用来治疗急性腹痛、肝癌和子宫颈癌,还用其解酒。2003年时,樟芝的市价达到每台斤十多万元至数十万元新台币。宋爱荣等研究了一种樟芝菌丝体发酵提取物,并将其在制备抗癌药物中应用,取得了专利。台湾葡萄王企业股份有限公司研发了樟芝保肝制剂,每人每日约 4.5g樟芝菌丝体3个月后,发现樟芝菌丝体具有抑制B型肝炎病毒的效果。说明樟芝还是有一定的食用或使用历史的。 4小结 樟芝发菌丝体雌、雄小鼠经口LD0 2000 mg/kg。根据LD50剂量分级标准,该样品属实际无毒级。遗传毒性试验(Ames试验、骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验 )的阴性实验结果表明,无遗传毒性作用。大鼠 30、90 d喂养试验结果,与对照组比较,各剂量组大鼠的一般情况、体重、食物利用率、血液学、血液生化学、脏体比及病理组织学检查均未见异常。500 mg/(kg·d)未显示任何致畸作用, 对大鼠胚胎发育无任何不良影响。根据食品安全评估的要求,樟芝子实体与菌丝体作为食品和药品的新原料是安全可行的,且具有广阔应用的前景。 【参考文献】 [1] 胡鸥, 张君逸, 卢喜, 等.樟芝及其研究开发概况[ J] .福建热作科技, 2006, 31(4):40-42. [2] SONGTuzz-ying,YENGow-chin.Antioxidant properties of Antrodia camphor- ate in submerged culture[J] .J Agric Food Chem, 2002,50:3322-3327. [3] 王伯徹, 陈启桢.食药用菇类的培养与应用[D].食品工业发展研究所.1998, 中国台湾. [4] HSIAOG, SHENM Y, LINKH.Antioxidative and hepatopmtective effects of Antrodia camphorate extract [J] .J Agric Food Chem, 2003, 51:3302-3308. [5] 孟繁 岳 ,车 会 莲 .樟 芝 抑瘤 作 用及 对 荷瘤 小鼠 免 疫功 能 的影 响[J].中国公共卫生 , 2005, 21(10):1224-1225. [6] 保健食品检验与评价技术规范 [S] .中华 人民共和国卫生 部 .卫法监发 [2003] 42号 [7] 郭曼延 , 刘宗荣 , 陈清农 .樟芝之口服急性毒性分析 [ D] .中 国农业 化学会第三十八次会员大会 .2000. [8]陈劲初 .樟 芝 功能 性 及 安 全 性 研 究 [ D] .清 华 大 学 生 命 科 学 院 .2007. [9] 吴铭芳 .国鼎樟芝安全性实验报 告 [ D] .台大医学 院实验动 物中 心研发组 .2008. [10]江素瑛 , 吴焜裕 , 王 秋萍 , 等 .樟 芝之致基 因毒性 、抗基因毒 性及 抗过敏性的 评估 [D].台 湾保 健食 品 学会 第二 届第 二次 会员 大会.2002. [11]陈巧文 .大鼠 28 天口服重复剂量毒性测试 -牛樟芝发酵菌 丝体预实验报告 [D].制药工业发展计书 .2001. [12]蔡明宪 , 林文鑫 , 曾虹萍 ,等 .大鼠致畸测试 -樟芝发酵原液 冻干成品 [ D].台湾保健食品学会第二届第一次会员大会 .2001. [13]胡鸥 , 连张飞 , 张君逸 .樟 芝的药 用保健 价值及 开发应 用 [J] .亚 热带植物科学, 2006, 35(4):75-78. [14] 陈体强 .台湾珍稀药用菌樟芝及 其寄 (腐 )生树种牛 樟 [J] .福建 农业科技 , 2003, (1):41-42. [15]宋爱荣 , 赵 晨 , 张 丽 , 等 .一种 樟芝 菌 丝体 发酵 提取 物及 其应 用[P] .中国专利 :CN1799562A, 2006-07-12. [16]陈 劲 初 , 陈 清 农 , 许 胜 杰 , 等 .樟 芝 保 肝 制 剂 [ P] .中 国 : CN1286545, 2002-12-25.

　　2、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。

　　3、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。

　　4、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

　　掌控内容空间的最后一公里——电信运营商如何转型为内容消费的主导者.PDF

　　原创力文档创建于2008年，本站为文档C2C交易模式，即用户上传的文档直接分享给其他用户（可下载、阅读），本站只是中间服务平台，本站所有文档下载所得的收益归上传人所有。原创力文档是网络服务平台方，若您的权利被侵害，请发链接和相关诉求至 电线) ，上传者